BCA蛋白浓度归一化计算器

等待输入

实验参数

默认标准曲线为 OD = 0.90336 × 浓度 + 0.1902。浓度单位按 ug/ul 处理。

BCA稀释倍数 10.00 体系总体积 / 蛋白原液体积
总蛋白需求 100.00 ug 单次上样 × WB次数
最终体系体积 50.00 ul 总蛋白 / 终浓度
Loading buffer 10.00 ul 最终体系 / X
每次上样体积 10.00 ul 单次上样蛋白 / 终浓度
建议终浓度 等待OD 按最低样本留5%余量

样品表

输入蛋白编号和 OD 值;在最后一行继续输入会自动新增空行。

蛋白编号 样品 OD 真实浓度
ug/ul
蛋白原液
ul
Loading buffer
ul
RIPA
ul
可设终浓度上限
ug/ul
状态 操作

计算方法

本工具默认按照“先测浓度,再统一总蛋白量和终浓度”的方法配样,适合 WB 上样前快速归一化。

浓度换算 真实浓度 = ((OD - b) / m) × (BCA体系总体积 / BCA中蛋白原液体积)
归一化体积 总蛋白 = 单次上样蛋白 × WB次数 最终体系 = 总蛋白 / 设定终浓度 蛋白原液 = 总蛋白 / 真实浓度 Loading buffer = 最终体系 / Loading buffer倍数 RIPA = 最终体系 - 蛋白原液 - Loading buffer

策略与提醒

更稳妥的归一化策略

不要固定套用 2 ug/ul。先看所有样本的最低真实浓度,再用“最低样本 × (1 - 1/Loading X)”估算全组可行终浓度上限;实际设定建议再留 5% 到 10% RIPA 余量。若 RIPA 为负,优先降低终浓度、减少总上样蛋白或提高 Loading buffer 倍数。