BCA蛋白浓度归一化计算器

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实验参数

固定终浓度法：先统一总蛋白量和终浓度，再反推每个样品所需蛋白原液、Loading buffer 和 RIPA。 最低浓度对齐法：以最低浓度样本为基准，其他样本加 RIPA 对齐，再分别加入 Loading buffer。

BCA稀释倍数 10.00 体系总体积 / 蛋白原液体积
总蛋白需求 100.00 ug 单次上样 × WB次数
最终体系体积 50.00 ul 总蛋白 / 终浓度
Loading buffer 10.00 ul 最终体系 / X
每次上样体积 10.00 ul 单次上样蛋白 / 终浓度
建议终浓度 等待OD 按最低样本留5%余量
最低浓度样本 等待OD 系统自动选取参考组
最低原液浓度 等待OD 以该浓度作为统一基准
稀释后终浓度 等待OD 最低原液浓度 × (X - 1) / X

样品表

输入蛋白编号和 OD 值；在 OD 列按回车可跳到下一行。 输入蛋白编号、OD 和吸取上清体积；新样品会自动沿用上一行上清体积，OD 列按回车可跳到下一行。

蛋白编号 样品 OD 吸取上清体积
ul		 真实浓度
ug/ul		 蛋白原液
ul		 Loading buffer
ul		 RIPA
ul		 可设终浓度上限
ug/ul		 稀释后终浓度
ug/ul		 状态 操作

计算方法

根据你选择的模式，系统会自动切换参数、表格列和计算结果，适配两类常见的 WB 蛋白归一化流程。

浓度换算 真实浓度 = ((OD - b) / m) × (BCA体系总体积 / BCA中蛋白原液体积)
归一化体积 总蛋白 = 单次上样蛋白 × WB次数 最终体系 = 总蛋白 / 设定终浓度 蛋白原液 = 总蛋白 / 真实浓度 Loading buffer = 最终体系 / Loading buffer倍数 RIPA = 最终体系 - 蛋白原液 - Loading buffer
最低浓度对齐法 最低浓度 = 所有有效样品真实浓度中的最小值 预混总体积 = 吸取上清体积 × 当前样品浓度 / 最低浓度 RIPA = 预混总体积 - 吸取上清体积 Loading buffer = 预混总体积 / (Loading buffer倍数 - 1) 稀释后终浓度 = 最低浓度 × (Loading buffer倍数 - 1) / Loading buffer倍数

策略与提醒

更稳妥的归一化策略

不要固定套用 2 ug/ul。先看所有样本的最低真实浓度，再用“最低样本 × (1 - 1/Loading X)”估算全组可行终浓度上限；实际设定建议再留 5% 到 10% RIPA 余量。若 RIPA 为负，优先降低终浓度、减少总上样蛋白或提高 Loading buffer 倍数。

最低浓度对齐法的适用场景

当你更关心快速统一样本浓度，而不想预先固定上样蛋白总量时，这种方法更直接。所有样品先对齐到最低原液浓度，再分别补加 Loading buffer，最终得到一个统一的稀释后终浓度。